摘要:
稀釋結(jié)晶法Rubisco是結(jié)晶的有效方法。稀釋結(jié)晶與Rubisco的沉淀提取步驟中的離子強(qiáng)度關(guān)系密切。pH5.4沉淀Rubisco，提高沉淀過程中的離子強(qiáng)度，有利于提高Rubisco沉淀的復(fù)溶率與結(jié)晶率和提高Rubisco結(jié)晶時(shí)pH與離子強(qiáng)度選擇范圍，使Rubisco的稀釋結(jié)晶提取方法更有效便捷。pH5.0下沉淀Rubisco，其復(fù)溶稀釋結(jié)晶耗長(zhǎng)、收率低、方法不穩(wěn)定。通過提高沉淀過程中的離子強(qiáng)度，其復(fù)溶液中Rubisco的復(fù)溶率與結(jié)晶率均較對(duì)照顯著提高。Rubisco沉淀過程中的離子強(qiáng)度直接影響到Rubisco沉淀物的規(guī)則性、沉淀的復(fù)溶率、復(fù)溶Rubisco的A280/A260值、OD390值，對(duì)結(jié)晶速率、結(jié)晶率以及結(jié)晶對(duì)pH與離子強(qiáng)度條件的選擇范圍均有重要影響。離子強(qiáng)度的選擇控制在0.6mol·L-1-1.5mol·L-1NaCl合適，過低與過高均不利于Rubisco的結(jié)晶。
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